選擇生物緩沖液時(shí)要考慮的五件事

時(shí)間：2021-05-19作者：武漢德晟生化科技有限公司瀏覽：57

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• 詞條

  詞條說明

• 電極中三（羥甲基）氨基甲烷（Tris）的作用

  Tris 或三（羥甲基）氨基甲烷，已被廣泛用作生物介質(zhì)中的pH緩沖液大約35年。這種生物緩沖液的近乎理想的特性是其受歡迎的原因。Tris不吸水，易溶于水，純度高。它不會(huì)沉淀鈣鹽，在室溫下在溶液中穩(wěn)定數(shù)月，并且似乎不會(huì)抑制許多酶系統(tǒng)。但是，Tris 緩沖液的化學(xué)和物理特性，使用不當(dāng)可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的pH測量的電極系統(tǒng)。 TRIS緩沖液中pH對電極的影響 生物化學(xué)家使用TRIS緩沖液將pH值控制在生理范

• 緩沖劑HEPES、PIPES的制備及注意事項(xiàng)

  HEPES HEPES是兩性離子Good's緩沖液，在6.8至8.2的pH范圍內(nèi)有效。這使HEPES在生理pH值下成為有效的緩沖液。該緩沖液可用于多種生物的細(xì)胞培養(yǎng)基中。它也可用作蛋白質(zhì)研究中的結(jié)合緩沖液，用于陽離子交換洗脫實(shí)驗(yàn)中，以及在凝膠電泳中用作運(yùn)行緩沖液。 HEPES的制備步驟： 要制備1升1M HEPES緩沖溶液，請將238.30 g HEPES溶解 在750 mL水中。使用10N氫氧化

• 吖啶酯(NSP-SA-NHS)蛋白標(biāo)記的發(fā)光染料配置說明

  吖啶酯（NSP-SA-NHS）Cas199293-83-9及其相關(guān)化合物已被證明是非常有優(yōu)勢的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物，其穩(wěn)定性、活性和敏感性超過了某些放射性同位素。吖啶酯能與含有一級氨基的蛋白發(fā)生反應(yīng)。在堿性條件下，NHS作為離去基團(tuán)被取代，蛋白質(zhì)與吖啶酯形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應(yīng)完成后，多余的吖啶鹽通過脫鹽柱除去。 在存在堿性過氧化氫時(shí)，吖啶標(biāo)記的蛋白不需要酶催化可自行發(fā)光。具體發(fā)光原理是在堿性過氧化氫溶液

• 有效轉(zhuǎn)移蛋白質(zhì)，您需知道以下緩沖液的配置技巧

  將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固體支持物是蛋白質(zhì)印跡的關(guān)鍵步驟。盡管這是一個(gè)簡單的過程，但仍需要一定程度的優(yōu)化，具體取決于蛋白質(zhì)的大小和凝膠的化學(xué)性質(zhì)。在這里，我們提供了一些技巧，可以有效地將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上。 1.根據(jù)蛋白質(zhì)調(diào)整緩沖液 無論您是使用現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)室方案還是出版物中的方案，都可能需要根據(jù)目標(biāo)蛋白重新校準(zhǔn)緩沖液配方。您可以將Towbin轉(zhuǎn)移緩沖液（25 mM Tris，192 mM甘氨酸，p