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詞條說明
正確選擇緩沖液Tris、HEPES和PIPES及注意事項(xiàng)
如何選擇緩沖區(qū) 選擇緩沖區(qū)時(shí),重要的是要考慮每個(gè)緩沖區(qū)的優(yōu)缺點(diǎn)。首先,您計(jì)劃在實(shí)驗(yàn)中使用的試劑的pH范圍必須與您選擇的緩沖液的pH范圍一致。其次,您必須考慮濃度,緩沖液毒性,溫度和反應(yīng)性。緩沖液的濃度必須足以說明您計(jì)劃在實(shí)驗(yàn)中使用的酸或堿的量。您計(jì)劃使用的pH改變成分越多,所需的緩沖液濃度就越高。緩沖液毒性非常重要,因?yàn)槟承┚彌_液可能會(huì)對(duì)正在使用的細(xì)胞產(chǎn)生毒性,因此,如果不確定毒性,可以在實(shí)驗(yàn)中使
緩沖溶液是包含弱酸及其共軛堿的水基溶液,由于緩沖液的化學(xué)性質(zhì),即使物質(zhì)發(fā)生化學(xué)變化,緩沖液也可以將它的PH值(酸度)保持在幾乎恒定的水平。緩沖液自然存在于血漿中,它保持血液PH值處于7.35-7.45之間。在有機(jī)系統(tǒng)中,天然緩沖液將PH值保持在一致的水平。但是在生物研究的過程中,必須通過緩沖液來保持PH值的不變。緩沖液種類繁多,Tris緩沖液是常用的生物緩沖液之一。 什么是 Tris 緩沖液? T
什么是生物緩沖液?分子生物實(shí)驗(yàn)中怎樣選擇緩沖液?
生物緩沖液由弱酸(質(zhì)子供體HA)及其共軛堿(質(zhì)子受體A-)組成,在水中,HA 可分解為 A-和 H+,H+與水反應(yīng)形成 H3O+,在緩沖水溶液中,H3O+、HA和H+相互平衡存在,緩沖機(jī)制由兩個(gè)可逆反應(yīng)組成,其中質(zhì)子供體和質(zhì)子受體的濃度相等。 在實(shí)驗(yàn)過程中通過酶活性將強(qiáng)酸或堿引入該系統(tǒng)時(shí),來自引入的酸或堿的新離子(H+或OH-)被緩沖液吸收,pH值保持穩(wěn)定防止蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的改變。在一些生化實(shí)驗(yàn)
魯米諾是一種化學(xué)發(fā)光試劑,在與血紅蛋白接觸時(shí),會(huì)發(fā)出發(fā)光現(xiàn)象。因?yàn)槠涮厥獾幕瘜W(xué)發(fā)光原理,常被運(yùn)用在刑偵案件偵查中,檢查犯罪現(xiàn)場(chǎng)血跡。雖然魯米諾的檢測(cè)給法醫(yī)和刑警提供了有效地分析線索。但是它也有一定的缺點(diǎn),除了血紅蛋白之外,還有很多物質(zhì)與它接觸也可以使它產(chǎn)生發(fā)光。 1、魯米諾在銅、含銅合金、辣根或某些漂白劑的存在下發(fā)出熒光。因此如果犯罪現(xiàn)場(chǎng)被漂白劑徹底處理過,則魯米諾發(fā)出的熒光會(huì)強(qiáng)烈掩蓋任何血跡的存
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