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有效轉(zhuǎn)移蛋白質(zhì),您需知道以下緩沖液的配置技巧
將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固體支持物是蛋白質(zhì)印跡的關(guān)鍵步驟。盡管這是一個簡單的過程,但仍需要一定程度的優(yōu)化,具體取決于蛋白質(zhì)的大小和凝膠的化學(xué)性質(zhì)。在這里,我們提供了一些技巧,可以有效地將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上。 1.根據(jù)蛋白質(zhì)調(diào)整緩沖液 無論您是使用現(xiàn)有的實驗室方案還是出版物中的方案,都可能需要根據(jù)目標(biāo)蛋白重新校準(zhǔn)緩沖液配方。您可以將Towbin轉(zhuǎn)移緩沖液(25 mM Tris,192 mM甘氨酸,p
在生化檢測時,我們對緩沖劑Tris、MOPS、CAPS等進行挑選時,首先考慮的就是緩沖劑的解離常數(shù)pKa和緩沖范圍,此外檢測體系的鹽效應(yīng)也是不能忽視的,同樣會對實驗結(jié)果造成影響。 氨丁三醇Tris緩沖劑 大多數(shù)生物系統(tǒng)都受到鹽的影響,檢測時所選用的緩沖液除了滿足體系所需的pH值范圍外,還應(yīng)保證盡量小的鹽效應(yīng)。特殊情況也會在實驗過程中添加鹽以進行調(diào)整,增加鹽效應(yīng)。像Tris、Bicine、MOPS等
PIPES中文名是哌嗪 N,N'二(2乙磺酸),它與HEPES緩沖液屬于同一家族,也是哌嗪緩沖液家族的一員,為兩性離子緩沖液,PIPES的有效PH值范圍為6.1至7.5內(nèi),不會與金屬絡(luò)合,所以常用于含金屬離子的溶液,也可使用于磷酸纖維素色譜純化微管蛋白,用于凝膠過濾法純化重組GTP結(jié)合蛋白ARF1和ARF2,作為緩沖液從大腸桿菌中結(jié)晶轉(zhuǎn)酮酶以及代替草甘膦緩沖液。另外,由于PIPES能形成自由基,因
吖啶酯(NSP-SA-NHS)蛋白標(biāo)記的發(fā)光染料配置說明
吖啶酯(NSP-SA-NHS)Cas199293-83-9及其相關(guān)化合物已被證明是非常有優(yōu)勢的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物,其穩(wěn)定性、活性和敏感性超過了某些放射性同位素。吖啶酯能與含有一級氨基的蛋白發(fā)生反應(yīng)。在堿性條件下,NHS作為離去基團被取代,蛋白質(zhì)與吖啶酯形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應(yīng)完成后,多余的吖啶鹽通過脫鹽柱除去。 在存在堿性過氧化氫時,吖啶標(biāo)記的蛋白不需要酶催化可自行發(fā)光。具體發(fā)光原理是在堿性過氧化氫溶液
公司名: 武漢德晟生化科技有限公司
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