詞條
詞條說(shuō)明
有效轉(zhuǎn)移蛋白質(zhì),您需知道以下緩沖液的配置技巧
將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固體支持物是蛋白質(zhì)印跡的關(guān)鍵步驟。盡管這是一個(gè)簡(jiǎn)單的過(guò)程,但仍需要一定程度的優(yōu)化,具體取決于蛋白質(zhì)的大小和凝膠的化學(xué)性質(zhì)。在這里,我們提供了一些技巧,可以有效地將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上。 1.根據(jù)蛋白質(zhì)調(diào)整緩沖液 無(wú)論您是使用現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)室方案還是出版物中的方案,都可能需要根據(jù)目標(biāo)蛋白重新校準(zhǔn)緩沖液配方。您可以將Towbin轉(zhuǎn)移緩沖液(25 mM Tris,192 mM甘氨酸,p
上樣緩沖液即loading buffer,是蛋白質(zhì)、核酸DNA與RNA的研究實(shí)驗(yàn)中溶解和添加樣品時(shí)所用的一類(lèi)上樣緩沖液,蛋白質(zhì)、DNA、RNA是不同的樣品,其上樣緩沖液也有所區(qū)別。 蛋白上樣緩沖液的組成 其緩沖液主要采用Tris-HCl(三羥甲基氨基甲烷鹽酸)或Tris甘氨酸、與EDTA鹽(乙二胺四乙酸二鈉),還需添加SDS,DTT(二流蘇糖醇),溴酚藍(lán),甘油等。 蛋白、DNA、RNA的上樣緩沖液
Trinder反應(yīng)中的過(guò)yang化物酶及其替代物
過(guò)yang化物酶可催化過(guò)yang化氫的氧化反應(yīng),在Trinder反應(yīng)、酶聯(lián)免疫、魯米諾發(fā)光反應(yīng)中催化顯色底物、發(fā)光底物與過(guò)yang化氫的反應(yīng)。過(guò)yang化物酶還有一些替代物,也能具有催化活性。 過(guò)yang化物酶替代物 過(guò)yang化物酶是一類(lèi)能催化過(guò)yang化氫氧化分類(lèi)或胺類(lèi)(如苯分、Trinder’s試劑、魯米諾)的酶,含有亞鐵原卟啉輔基,過(guò)yang化物酶、過(guò)yang化氫酶,另外過(guò)yang化物模擬
緩沖溶液是包含弱酸及其共軛堿的水基溶液,由于緩沖液的化學(xué)性質(zhì),即使物質(zhì)發(fā)生化學(xué)變化,緩沖液也可以將它的PH值(酸度)保持在幾乎恒定的水平。緩沖液自然存在于血漿中,它保持血液PH值處于7.35-7.45之間。在有機(jī)系統(tǒng)中,天然緩沖液將PH值保持在一致的水平。但是在生物研究的過(guò)程中,必須通過(guò)緩沖液來(lái)保持PH值的不變。緩沖液種類(lèi)繁多,Tris緩沖液是常用的生物緩沖液之一。 什么是 Tris 緩沖液? T
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